Colorazione e montaggio

Materiale didattico: Dott. Gianfranco Militerno
Video: Dott. Carlo Bianco
Ringraziamenti: Stefano Ghiotto

Colorazione con ematossilina-eosina

La colorazione deve essere effettuata su sezioni di tessuto fissato in formalina ed incluso in paraffina, di 3-5 micrometri di spessore, deposte su un vetrino portaoggetto e lasciate asciugare per almeno 12 ore a 37°C o per almeno 24 ore a temperatura ambiente.

Mettere i vetrini in un cestello portavetrini e immergere il cestello in vaschette contenenti i reagenti di seguito elencati per i tempi specificati.

• Xilene o sostitutivo dello xilene: 2 passaggi di 15 minuti
• Alcool 100%: 2 passaggi di 1 minuto ciascuno
• Alcool 95%: 1 passaggio di 1 minuto
• Alcool 80%: 1 passaggio di 1 minuto
• Alcool 50%: 1 passaggio di 1 minuto
• Acqua distillata: 1 passaggio di 3 minuti
• Ematossilina di Harris: 7 minuti
• Lavaggio in acqua distillata
• Acqua corrente: 5 minuti
• Eosina all’1% in soluzione acquosa: 20 secondi
• Lavaggio in acqua corrente
• Lavaggio in alcool 50%
• Lavaggio in alcool 80%
• Lavaggio in alcool 95%
• Alcool 100%: 2 passaggi di 3 minuti ciascuno
• Xilene o sostitutivo dello xilene: 2 passaggi di 3 minuti ciascuno

Montaggio dei vetrini coprioggetto

Depositare sulla sezione una goccia di montante con una bacchetta di vetro e adagiare sulla goccia un vetrino coprioggetto di dimensioni proporzionate a quelle della sezione.